绿脓杆菌，实验动物里需要盯紧的潜伏选手

NAC（溴化十六烷基三甲铵琼脂）上的绿脓杆菌，自带辨识度极高的绿色信号。

在实验动物的微生物监测工作中，NAC琼脂上那一抹醒目的绿色菌落，常常是警报信号。不少动物设施在鼠、兔、非人灵长类的筛查中，都会遇到绿脓杆菌检出的情况。

它不是烈性暴发菌，却是实验动物领域非常典型的条件致病菌；平时可以安静"潜伏"，一旦动物应激、免疫下降，就会造成动物患病，随即可能带来一连串的实验干扰，很多设施都吃过它的亏。

今天一次性讲透

01它到底是谁

02怎么把它查出来

03它藏在设施的哪里

04检出阳性怎么处置

05从检测到试剂盒的方案

01 什么是绿脓杆菌？

绿脓杆菌（学名铜绿假单胞菌，Pseudomonas aeruginosa），革兰阴性、需氧杆菌，最大辨识度就是能产生绿脓菌素，在选择性培养基上呈现标志性绿／蓝绿色；它环境适应力极强，水、垫料、饮水管道、笼具、通风系统都能存活。

对健康动物 常呈无症状带菌；

对免疫缺陷鼠、幼龄动物、应激个体 可引发中耳炎、肺炎、皮下脓肿、败血症，甚至直接改变免疫指标、肿瘤模型、药效数据，造成整批实验数据偏移、结果不可重复。

⚠️ 重点提醒：它还是影响动物福利、微生物等级达标的重要监测项，也是很多设施年度核查、课题溯源时的高频关注点。

02 我们怎么检测它？

1采样：肛拭子、鼻拭子、环境拭子（饮水、笼架、送风口等）；

2选择性增菌／分离培养：接种到 NAC 琼脂，（36±1）℃培养观察典型绿色菌落；

3生化鉴定／qPCR：纯培养后做确认，排除其他产绿色素假单胞菌，再借分子生物学手段进一步确认；

4出具完整微生物检测报告，给出阳性风险提示与溯源建议。

注意：很多实验室容易踩坑——不是所有绿色菌落都是绿脓杆菌；仅凭肉眼判读不够稳妥，必须辅以生化或分子方法确认。

03 设施流行情况：它藏在哪里？

⚠️ 比你以为的更常见！

根据中国实验动物学会组织的全国七家监测中心 2020—2024 年联合统计，绿脓杆菌在送检小鼠中的检出率为 3.14%（2,994/95,204），在大鼠中为 2.92%（287/9,837）。复旦大学的供应商来源监测中，检出率为 3.16%，是仅次于金黄色葡萄球菌的不合格细菌学指标。

关键数据

3.14%小鼠检出率（2020—2024 全国七家监测中心）

2.92%大鼠检出率（同期统计）

10.00%2021 年江西大鼠检出率

区域性数据同样值得警惕。江西省 2020—2024 年监测中，2021 年大鼠绿脓杆菌检出率达到 10.00%，2023 年小鼠检出率为 2.78%。

传播性质 它不是高度接触烈性传染病，但属于典型「水源＋环境常驻菌」；

高发诱因 饮水系统长期未充分消杀、水质管控疏漏、垫料受潮、设施温湿度偏高、动物长期运输／造模带来强应激；

易感物种 免疫抑制小鼠更易检出；兔、非人灵长类也偶见阳性；

扩散特点 单点阳性若不及时干预，很容易顺着水线、跨笼操作、工具交叉污染扩散成全群问题；早期很难凭外观发现。

04 检出阳性后：怎么科学处置？

消毒的关键：先破生物膜，再谈杀灭

绿脓杆菌的生物膜是消毒失败的首要原因。常规冲洗和泵送过氧乙酸（4000 ppm）均未能降低绿脓杆菌水平，手动注入过氧乙酸效果也有限。最有效的方法是在线热冲洗（in-line thermal flushing），但即便如此也未能完全根除生物膜。

对动物设施而言，这意味着：定期冲洗水线、单纯添加消毒剂，不足以清除已形成的生物膜。需要结合机械清洗（如刷洗管道）、高温处理或能破坏生物膜结构的专用清洗剂，再进行消毒，才能有效降低环境中的绿脓杆菌载量。

环境管理：切断传播链

绿脓杆菌的主要传播途径是环境接触和饮水污染。防控重点包括：饮水管线定期清洗消毒并监测水质；笼具、垫料保持干燥，避免潮湿表面成为细菌繁殖温床；新引入动物严格执行隔离检疫，防止带入潜伏感染个体。

阳性动物的处理

一旦检出绿脓杆菌阳性，应根据设施等级和实验目的决定处置方案。对于 SPF 级核心种群，通常建议淘汰阳性动物并进行环境彻底消毒。对于普通级设施或非关键实验，可在评估风险后考虑隔离饲养和针对性干预，但需注意绿脓杆菌的耐药性问题——盲目用药不仅无效，还可能加剧耐药菌株的筛选。

05 配套解决方案：从检测到试剂盒

作为专注实验动物病原监测的第三方检测机构，我们可以提供：

✅ 绿脓杆菌在内的一整套实验动物病原委托检测服务；

✅ 配套绿脓杆菌分离检测试剂盒（含分子生物学相关方案），帮助实验室实现内部初筛、常态化自检。

qPCR 检测扩增曲线（试剂盒来自酷可诺生物技术有限公司）

如果您的设施正在做微生物监测，或需要绿脓杆菌专项检测／试剂盒支持，欢迎后台留言 「检测」 或 「试剂盒」，我们会安排技术同事对接。

参考依据

1. GB 14922.2-2022《实验动物 微生物、寄生虫学等级及监测》

2. 2020 年~2024 年啮齿类实验动物国内多检测机构病原检出数据分析《中国比较医学杂志》

3. 2020-2024 年江西省实验动物的微生物、寄生虫检测结果分析《实验动物与比较医学》

4. 铜绿假单胞菌：从病原生物学到临床治疗的挑战《生命的化学》

5. GB 14926.17-2001《实验动物 绿脓杆菌检测方法》